土壤脲酶 (S-UE) 活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 |
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土壤脲酶 (S-UE) 活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 微量法 注意：正式測(cè)定之前選擇預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 規(guī)格：100T/48S 產(chǎn)品內(nèi)容： 試劑一： 甲苯2mL×1 瓶，4℃保存； (自備) 試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入9mL 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的試劑4℃保 存； 試劑三：液體19mL×1 瓶，4℃保存； 試劑四A 液：液體0.4mL×1 支，4℃保存； 試劑四B 液：液體1.6mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將A 液倒入B 液中混合，待用；用不完的試 劑4℃保存一周； 試劑五：液體 2mL×1 瓶，4℃保存； 標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，1mg/mL 氮標(biāo)準(zhǔn)液。 產(chǎn)品說(shuō)明： S-UE能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、 全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水 解尿素產(chǎn)生的NH3-N。 需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰、甲苯 (不允許快遞) 和蒸餾水。 操作步驟： a. 培養(yǎng)
b. 將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋10 倍 (取0. 1mL 上清液，加入0.9mL 蒸餾水) 。若最終計(jì)算得到的 ΔA仍大于0.5繼續(xù)稀釋。 c. 標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備：吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋至10 、8 、6 、4 、2 、1 、0.5 、0μg/mL。 d. 測(cè)氨量 (在微量玻璃比色皿或96 孔板中加入下列試劑)
混勻，于 630nm 處，蒸餾水調(diào)零，讀吸光值 A ，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一 個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度 (y) 和吸光度 ( x,減去濃度為 0 的空白管) ，做標(biāo) 準(zhǔn)曲線。 脲酶活力計(jì)算 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA帶入公式 (x ) 計(jì)算測(cè)定中樣品的濃度 (μg/mL) y值。 單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μgNH3-N定義為一個(gè)酶活力單位。 脲酶活力 (U/g 土樣) ＝y×10×V反總÷W÷T=60×y 10：稀釋倍數(shù)；T ：反應(yīng)時(shí)間，1d；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.3mL；W：樣本質(zhì)量，0.05g。 從2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤(rùn)色服務(wù)，協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年，是您值得信賴的科研合作伙伴! 如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。
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